[উদ্দেশ্যে ব্যবহার]
এই কিটটি বাস্তব ব্যবহার করে সিরাম বা ক্ষত এক্সিউডেট নমুনায় মাঙ্কিপক্স ভাইরাস (এমপিভি) সনাক্তকরণের জন্য ব্যবহৃত হয়
সময় পিসিআর সিস্টেম।
[ডায়াগনস্টিক কিটের উপাদান]
| না. |
বিকারক নাম |
বৈশিষ্ট্য এবং পরিমাণ |
| 50T |
200T |
| 1 |
এমপিভি পিসিআর মিক্স |
750μl × 1 টিউব |
750μl × 4 টিউব |
| 2 |
এমপিভি এনজাইম মিক্স |
200μl × 1 টিউব |
200μl × 4 টিউব |
| 3 |
অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ (IC) |
100μl × 1 টিউব |
100μl × 4 টিউব |
| 4 |
MPV নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ |
100μl × 1 টিউব |
100μl × 4 টিউব |
| 5 |
এমপিভি পজিটিভ কন্ট্রোল |
100μl × 1 টিউব |
100μl × 4 টিউব |
| 6 |
নির্দেশনা |
1 পরিবেশন |
1 পরিবেশন |
বিঃদ্রঃ:1. বিভিন্ন কিট লট থেকে উপাদান মিশ্রিত বা বিনিময় করবেন না।
2. MPV নেগেটিভ কন্ট্রোল হল জীবাণুমুক্ত নিউক্লিজ-মুক্ত জল এবং অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ (IC) জিন, এবং MPV পজিটিভ কন্ট্রোল হল DNA ইন ভিট্রো যাতে লক্ষ্য জিন এবং অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ (IC) জিন থাকে।
[পরীক্ষা পদ্ধতি]
1. বিকারক প্রস্তুতি(সঞ্চালিত এ "বিকারক প্রস্তুতি অঞ্চল”)
1.1 ডায়াগনস্টিক কিটান থেকে প্রতিটি উপাদান বের করুন এবং ঘরের তাপমাত্রায় রাখুন।রিএজেন্টগুলিকে কক্ষের তাপমাত্রায় ভারসাম্য বজায় রাখার অনুমতি দিন, তারপরে পরবর্তীতে ব্যবহারের জন্য যথাক্রমে প্রতিটিকে ঘূর্ণন করুন।
1.2 পরীক্ষার নমুনার পরিমাণ অনুযায়ী, MPV পজিটিভ কন্ট্রোল, MPV নেগেটিভ কন্ট্রোল এবং ইন্টারনাল কন্ট্রোল (IC),
এমপিভি পিসিআর মিক্স এবং এমপিভি এনজাইম মিক্সের উপযুক্ত পরিমাণে পাইপেট (এমপিভি পিসিআর মিক্স 15 μl/টেস্ট +এমপিভি এনজাইম মিক্স 4 μl/পরীক্ষা + অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ (IC) 1 μl/পরীক্ষা), একটি পিসিআর-মাস্টারমিক্স তৈরি করতে তাদের পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে মিশ্রিত করুন, সেন্ট্রিফিউজিতে। পরে ব্যবহার।
| বিকারক নাম |
1 নমুনা |
10 নমুনা |
25 নমুনা |
50 নমুনা |
100 নমুনা |
200 নমুনা |
| MPV PCR মিক্স(μl) |
15 |
150 |
375 |
750 |
1500 |
3000 |
| MPV এনজাইম মিক্স(μl) |
4 |
40 |
100 |
200 |
400 |
800 |
| অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ (IC) |
1 |
10 |
25 |
50 |
100 |
200 |
| পিসিআর-মাস্টারমিক্স |
20 |
200 |
500 |
1000 |
2000 |
4000 |
| দ্রষ্টব্য: উপরের কনফিগারেশনটি শুধুমাত্র আপনার রেফারেন্সের জন্য এবং পিসিআর-মাস্টারমিক্সের পর্যাপ্ত ভলিউম নিশ্চিত করতে, প্রকৃত পাইপটিং এর আরও ভলিউম প্রয়োজন হতে পারে। |
1.3 পরবর্তীতে ব্যবহারের জন্য উপরের প্রস্তুত বিকারকগুলিকে "নমুনা প্রক্রিয়াকরণ অঞ্চলে" স্থানান্তর করুন।
2. প্রক্রিয়াকরণ এবং লোড হচ্ছে এর নমুনা (সঞ্চালিত এ "নমুনা প্রক্রিয়াকরণ অঞ্চল”)
2.1 এই ডায়াগনস্টিক কিটে ভাইরাল RNA&DNA এক্সট্রাকশন কিট অন্তর্ভুক্ত নেই।ভাইরাল ডিএনএ বের করার জন্য Changsha Renji Medical Equipment Co., Ltd. দ্বারা উত্পাদিত ভাইরাল RNA&DNA এক্সট্রাকশন কিট ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয়।নির্দিষ্ট অপারেশন তার নির্দেশাবলী অনুযায়ী হয়।
2.2 উপরের প্রক্রিয়াকৃত নমুনা, MPV পজিটিভ কন্ট্রোল এবং MPV নেগেটিভ কন্ট্রোল এবং ক্যাপথে টিউব সহ PCR প্রতিক্রিয়া টিউবে 20μl PCR-Mastermix যোগ করুন।ফ্লুরোসেন্স পিসিআর ইনস্ট্রুমেন্টে ফ্লুরোসেন্স পরিমাণগত পিসিআর সনাক্তকরণ চালান।
3.পিসিআর পরিবর্ধন (সঞ্চালিত এ "নিউক্লিক অ্যাসিডমপ্লিফিকেশন এলাকা”)
3.1 প্রশস্তকরণ সরঞ্জামের নমুনা কূপের মধ্যে PCR প্রতিক্রিয়া টিউব রাখুন।MPV পজিটিভ কন্ট্রোল, MPV নেগেটিভ কন্ট্রোল সেট আপ করুন এবং নমুনাগুলি সংশ্লিষ্ট ক্রম এবং ইনপুট নমুনা নামে পরীক্ষা করার জন্য।
3.2 পিসিআর পরিবর্ধনের জন্য নিম্নলিখিত সারণী অনুযায়ী চক্র পরামিতি সেট করুন।
| ধাপ |
প্রতিক্রিয়া পদক্ষেপ |
তাপমাত্রা |
সময় |
সাইকেল |
| 1 |
UNG এনজাইম বিক্রিয়া |
50℃ |
২ মিনিট |
1 |
| 2 |
TAQ এনজাইম বিক্রিয়া |
95℃ |
3 মিনিট |
1 |
| 3 |
বিকৃতি |
95℃ |
10s |
40 |
| অ্যানিলিং |
55℃ |
30s* |
দ্রষ্টব্য: 1) ফ্লুরোসেন্স সংগ্রহ "ধাপ 3: 55 ° C, 30s" এ সেট করা হয়েছে।সনাক্তকরণ চ্যানেলগুলির নির্বাচন: FAM এবং Cy5, যেখানে FAM চ্যানেল হল টার্গেট জিন, Cy5 চ্যানেল হল অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ (IC) জিন, এবং প্রতিক্রিয়া সিস্টেমটি 25 μl এ সেট করা হয়েছে।
2) ABI সিরিজের ফ্লুরোসেন্ট PCR ইন্সট্রুমেন্ট ROX ক্রমাঙ্কন নির্বাচন করে না এবং Noneforthe quenching group নির্বাচন করে।
আপনার বার্তাটি 20-3,000 টির মধ্যে হতে হবে!
